项目简介:
将自体运输蛋白BrkA的N端信号肽及后续的17个氨基酸、部分Passenger结构域和C端跨膜转运结构域等负责定位和运输的核苷酸序列、以及6个His和多克隆位点构建到PET-22b上形成通用型呈递载体pAutoDisplay;将目标蛋白绿色荧光蛋白GFP和漆酶CotA通过多克隆位点连接到呈递载体pAutoDisplay上,构成细菌表面呈递质粒pAutoDisplay-GFP和pAutoDisplay-CotA, 质粒pAutoDisplay-GFP使大肠杆菌细胞呈现绿色荧光; 质粒pAutoDisplay-CotA使大肠杆菌细胞具有漆酶活性,可以催化氧化漆酶的特征底物。利用本发明构建的功能性细菌证明,BrkA呈递系统在细菌表面成功呈递目标蛋白,可用于全细胞生物催化。
